更新時間:2024-11-29
鴨肝炎病毒1型(DHV-1)核酸檢測試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品CDH4 Others Human R-Cadherin / CDH4 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 半鈣鹽Oxytetracycline hemicalcium salt美國進(jìn)口扁桃體上皮細(xì)胞HTEpiCN-羥乙酰神經(jīng)氨酸N-Glycolylneuraminic Acid美國進(jìn)口HA Others H5N9 甲型流感 H5N9 (A/
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:鴨肝炎病毒1型(DHV-1)核酸檢測試劑盒
規(guī)格:50T
編號:BH-P96751
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
Promocell C-27438 Adipocyte Nuition Medium, 脂肪細(xì)胞營養(yǎng)培養(yǎng)基(即用型) 500ml維多利亞藍(lán)B,堿性藍(lán) 26Victoria blue BBS
小鼠心肌細(xì)胞MCM考馬斯亮藍(lán)R250Brilliant Blue RBS
CD8B Others Human CD8B / P37 / LEU2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 考馬斯亮藍(lán)G250Brilliant Blue GBS
肺細(xì)胞;HLF-a溴酚藍(lán)Bromophenol blueIND
大鼠肝細(xì)胞;BRL 膽囊癌細(xì)胞,GBC-SD細(xì)胞 CBRH7919細(xì)胞,大鼠肝癌細(xì)胞(wistar大鼠)固藍(lán)BFast Blue B SaltBS
表皮色素細(xì)胞-淺色素(HEM)( 5×105 ) mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞 Mouse醫(yī)用凡士林BRVaseline
CM-H017上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL原釩酸鈉>96%,BR orthovanadate
ICOS Others Rat 大鼠 ICOS / AILIM / CD278 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 蝙蝠葛諾林堿()HPLC≥98%,Daurinoline
主動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells 5 × 105方(1ml)氯化木蘭花堿HPLC≥98%,Magnoflorine chloride
NB4細(xì)胞,急性早幼粒白血病細(xì)胞 綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細(xì)胞,MFC-GFP細(xì)胞 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-sf-prf木蘭花堿HPLC≥98%,Magnoflorine
鴨肝炎病毒1型(DHV-1)核酸檢測試劑盒內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HDLECL千金子素L1()供含量測定用Euphorbiasteroid
GFRA1 Others Rat 大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 異型南五味子丁素()含量測定heteroclitin D
侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細(xì)胞;MuM-2C紫蘇醛()含量測定(-)-PERILLALDEHYDE
9204細(xì)胞,肝癌細(xì)胞 大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞,RBL-2H3細(xì)胞 山羊腎上皮樣細(xì)胞;DG-K1相思子堿()供鑒別用L-ABRINE
MDA-MB-231(癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×26'-羥甲基美國進(jìn)口6'-Hydroxymethyl Simvastatin