訂購信息：
 產品名稱：單增李斯特菌核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）
規(guī)格：50T
編號：BH-P96703
分類：熒光PCR法
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
產品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

準備物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產品說明書                                   1份
使用及效果：
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
腎小管上皮細胞;HKC苷H（）Tenacissoside HHPLC≥98%，

NCI-H345細胞，小細胞肺癌細胞 小鼠腦神經瘤細胞,Neuro-2a細胞 CM-H119腦膜細胞*培養(yǎng)基100mLE（）Cucurbitacin EHPLC≥95%，

PA317(小鼠成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2鉤吻素子（）KoumineHPLC≥98%，

Promocell C-27439 Adipocyte Nuition Medium KIT, 脂肪細胞營養(yǎng)培養(yǎng)基套裝 500ml鉤吻素甲（）GelsemineHPLC≥98%，

小鼠源細胞原B1（）Procyanidin B1HPLC≥95%，
虹膜色素上皮細胞RNAHIPEpiC miRNA5 μg表兒茶素沒食子酸酯()(−)-Epicatechin gallate/ECG HPLC≥98%，

LILRA5 Others Rat 大鼠 LILRA5 細胞裂解液 (陽性對照) 表告依春（）EpigoitrinHPLC≥98%，

心室肌細胞*培養(yǎng)基 100mL表沒食子兒茶素（）(−)-Epigallocatechin/EGC HPLC≥98%，

PC-12細胞，大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化) 22RV1(前列腺癌細胞) 肝癌細胞;SMMC-7721表小檗堿（）EpiberberineHPLC≥98%，

PF4 Protein Human 重組 CXCL4 / PF4 蛋白濱蒿內酯（）ScoparoneHPLC≥98%，
單增李斯特菌核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）U251(膠質瘤細胞) 5×106cells/瓶×2對胺100克

HUF-c 類成纖維細胞(HUF) 500,000cells 腎上皮細胞Many types of cells　5 × 105方(1ml)2,3-二錄本加醋 2,3-Dichlorobqnzoic ccid 20-42-3

卵巢成纖維細胞Many types of cells　5 × 105方(1ml)癸酸500毫克

FCGR2A Others Cynomolgus 食蟹猴 CD32a / FCGR2A 細胞裂解液 (陽性對照) 遠藤氏瓊脂培養(yǎng)基250克RT

MIN6 小鼠胰島素瘤細胞4595-60-22-溴嘧啶2-Bromopyrimidine
檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。