更新時間:2024-11-25
前胡染料法PCR鑒定試劑盒說明書公司相關產(chǎn)品 西紅花苷II 異嗪皮啶 Isofraxidin 486-21-5 分子式:C11H10O5 分子量:222.19漆黃素 Fisetin 非瑟素 Fisetin 528-48-3 分子式:C15H10O6 分子量:286.24山梔苷甲酯 Hanzhiside methyl ester 山梔苷甲酯 Hanzhiside
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱 | 前胡染料法PCR鑒定試劑盒說明書 |
英文名稱 | peucedani |
貨號 | BH-P99689 |
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測。
二、DNA提?。?/span>
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應試劑盒說明進行操作。
1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應。
2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應。
4、其他液體標本:取標本2-3mL,13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min,13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應。
注:陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D3 IV型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL(標準品)Vinblastine Sulfate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
HGC-27人胃癌細胞 Human(進分)Vinblastine Sulfate質(zhì)量規(guī)格:進分Sigma V1377
CLMP Others Mouse 小鼠 ASAM / ACAM 人細胞裂解液 (陽性對照) Temozolomide質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
人小梁網(wǎng)細胞RNAHTMC miRNA5 μg(標準品)Temozolomide質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
ILKAP Others Human 人 ILKAP 人細胞裂解液 (陽性對照) Amiglutethimide質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP30,BR,可用于細胞培養(yǎng)
293[HEK-293]細胞,人胚腎細胞 人盲腸腺癌細胞(未分化),Hce-8693細胞 CM-R013大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL阿巴卡韋 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRAbacavir
大鼠雪旺細胞;RSC96阿巴卡韋 (標準品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品Abacavir
ENPP7 Others Human 人 ENPP7 / NPP-7 人細胞裂解液 (陽性對照) 衣康酸(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRItaconic acid
大鼠骨髓瘤細胞;Y3-Ag 1.2.3哲納爾氏染色素質(zhì)量規(guī)格:BSJenner's stain
PRSS8 Others Mouse 小鼠 Prostasin / PRSS8 (aa 30-289) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 蛋白激酶仰制劑KT5823(>97%(HPLC),BC)質(zhì)量規(guī)格:>97%(HPLC),BCKT-5823
HEL細胞,紅白血病細胞 人肺腺癌細胞系,PG49細胞 表皮角化細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)鉻天青S(Ind Grade)質(zhì)量規(guī)格:Ind GradeCAS, Chrome azurol S
狗腎細胞隆突型;MDCK superdome5'-三1酸胞苷二鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學級Cytidine-5'-triphosphate (CTP), di salt
RK3 Others Human 人 kC / RK3 人細胞裂解液 (陽性對照) 纖維素酶(酶活>45 U/mg)質(zhì)量規(guī)格:酶活>45 U/mg,BCCellulase
CL-0272EA.hy926(人臍靜脈細胞融合細胞)5×106cells/瓶×2DL-質(zhì)量規(guī)格:0.99DL-Proline
HA Others H6N4 甲型流感 H6N4 (A/chicken/HongKong/17/77) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) DL-甲酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:0.98DL-Alanine methyl ester
前胡染料法PCR鑒定試劑盒說明書SK-MEL-1(人皮膚色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2TAPS;N-三(羥甲基)甲基-3-氨基丙磺酸質(zhì)量規(guī)格:>99%,細胞培養(yǎng)級TAPS
HEC-1-A(人內(nèi)膜腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2 獼猴皮膚細胞;MMS7PI3K 抑制劑質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,進分LY294002
人髓母細胞瘤細胞;D341Med羥乙基磺酸鈉質(zhì)量規(guī)格:>98.5%SHES
EGF Others Mouse 小鼠 EGF
實驗流程:
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。