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如何提取病毒核酸技術
  • 發(fā)布日期:2020-01-03      瀏覽次數(shù):2025
    • 提取病毒核酸的試劑盒和方法技術其特征在于,包括裂解液、結合液、第yi漂洗液、第二漂洗液、洗脫液、二氧化硅磁珠、蛋白酶K和核酸助沉劑,其中,所述第yi漂洗液含有所述結合液和檸檬酸鈉。

      核酸的提取純化是進行分子生物學各項研究的基礎,特別是在分子診斷領域,PCR、RT-PCR、Northernblot、RT-qPCR、cDNA文庫構建、酶切等技術手段都需要純度高、完整性好的核酸。但由于外源及內源性核酸酶的存在及其酶活性相當穩(wěn)定等原因,使得提取和純化高質量的核酸相對比較困難。核酸提取試劑配方對核酸的質量和得率有很大的影響,因此研發(fā)高效快速、回收范圍廣、得率高的核酸提取試劑是本領域不斷探索的課題。磁珠法作為近年來興起的新型核酸提取方法,主要原理是基于磁性納米材料一在高鹽環(huán)境下對核酸進行特異性的吸附,經過磁性分離和漂洗雜質后,在低鹽溶液中被洗脫下來,從而達到對核酸進行提取純化的目的。

      試劑盒目前市場上用于核酸提取的裂解液種類較多,常見的有經典的TRIzol、CATB-LiCl、堿裂解液等。TRIzol含有、異硫氰酸胍等物質,能迅速破碎細胞并抑制細胞內源性核酸酶,保持提取核酸的完整性;但是其用時操作繁瑣、費時,提取樣本中核酸的質量不佳。

       

       

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