ELISA實(shí)驗(yàn)中血清的采集、處理和保存;
1、 真空采血針采集2ml新鮮血液,加入無(wú)菌試管中;
2、 采血后室溫靜置1小時(shí);
3、 將采集血液用離心機(jī)4℃,2500rpm離心10min,,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉淀。
4、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/p>
2-8℃下,可放置保存24-48小時(shí);
-20℃下,可放置保存1個(gè)月;
-70℃下,可放置保存6個(gè)月;
5、 根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要,取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測(cè)定。
大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的 ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。此外還應(yīng)避免細(xì)菌污染,因?yàn)榫w中可能含有含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。血清標(biāo)本宜在新鮮 時(shí)檢測(cè)。如在冰箱中保存過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。